Преимплантационная генетическая диагностика

Преимплантационная генетическая диагностика  (анализ хромосом).
Преимплантационная  генетическая диагностика  (ПГД) представляет собой комплекс мероприятий, направленных на выявление генетических аномалий у эмбрионов, полученных в циклах ЭКО, до момента их имплантации в стенку матки, то есть до наступления беременности.

По мере накопления данных, свидетельствующих о том, что численные (т.н. «анеуплоидии») и структурные хромосомные аномалии являются одной из главных причин спонтанных абортов и невынашиваний,  ПГД стала широко применяться для выявления хромосомных патологий эмбриона.

Согласно данным ведущих клиник ЭКО, до 40-80% доимплантационных эмбрионов человека имеют хромосомные аномалии.

До появления преимплантационной генетической диагностики единственным вариантом для супружеских пар было проведение амниоцентеза (забор амниотической жидкости - жидкости, окружающей плод в матке. Амниотическая жидкость содержит клетки плода, которые в последующем культивируются в течение 2-3 недель и исследуются на наличие генетических аномалий). Основной недостаток амниоцентеза заключается в том, что, если плод является носителем заболевания, супругам необходимо принять решение о том, будут ли они прерывать беременность или сохранять беременность, зная, что у них родится больной ребенок. ПГД дает таким парам возможность выбора. После проведения анализа пациентке переносят только здоровые эмбрионы. Женщина беременеет, зная, что вынашиваемый ею ребенок не является носителем генетического заболевания. Также генетическая диагностика позволяет определить пол будущего ребенка, поскольку можно перенести в матку эмбрионы с XX («девочек») или XY («мальчиков») хромосомами. Это бывает необходимо, например, при носительстве X-сцепленных наследственных заболеваний.

ПОКАЗАНИЯ для проведения преимплантационной диагностики: 

• Возраст женщины (старше 34 лет);
• Неудачные попытки ЭКО в анамнезе;
• Спонтанные аборты и невынашивания (более 2 раз);
• Измененный кариотип абортивного материала;
• Ребенок с генетическими аномалиями в анамнезе;
• Возраст мужчины (старше 39 лет) или ненормальный анализ спермы по FISH.

ПОСЛЕДСТВИЯ подсадки эмбриона с хромосомной аномалией:

• Отсутствие  имплантации;
• Спонтанное прерывание беременности;
• Смерть плода;
• Рождение ребенка с хромосомной патологией.

Не все генетические патологии могут быть диагностированы с помощью ПГД. Диагностика позволяет выявить отклонение в количестве хромосом  (анеуплоидия) и изменения в структуре хромосом. В эмбрионах с анеуплоидией отсутствует одна хромосома (моносомия), или имеется лишняя хромосома (трисомия).  Наиболее распространенной хромосомной патологией является трисомия (три хромосомы вместо двух в норме) по 21-й хромосоме, или синдром Дауна. Возможно рождение живых детей с трисомиями по хромосоме 13 (синдром Патау), хромосоме 18 (синдром Эдвардса). Эти хромосомные болезни характеризуются еще более тяжелыми, чем при синдроме Дауна, пороками умственного и физического развития. Как правило, такие дети не живут более года.

Моносомия по любым хромосомам (кроме случая отсутствия одной Х хромосомы, ХО, синдром Шерешевского-Тернера) приводит к замершей беременности или отсутствию беременности.

Трисомия по остальным (кроме случая  ХХY и уже упомянутым 13,18 и 21-й) хромосомам также является причиной остановки развития плода.

Во всех вышеперечисленных случаях бластомеры не используются для подсадки, а беременной женщине показано прерывание беременности.

ПГД не отменяет необходимость  дальнейшего наблюдения за развитием плода и не заменяет последующие ультразвуковое и биохимические обследования, а также более традиционную пренатальную генетическую диагностику. Так, последующая пренатальная диагностика может быть необходима в случае пациентов-носителей хромосомных перестроек для подтверждения нормального развития плода.

В настоящее время в ПГД применяются два основных вида генетических исследований: для выявления анеуплоидий и аббераций хромосом используется  метод FISH (флуоресцентной гибридизации in situ); моногенные генетические заболевания определяются с помощью метода single cell ПЦР  (полимеразной цепной реакции с одной клетки).

Исследование  количества хромосом в бластомерах или биоптатах хориона методом FISH

1. Анеуплоидии по 21- й и X,Y хромосомам (определяются при анализе на 3 хромосомы)

2. Анеуплоидии по 13, 18, 21- й и X,Y хромосомам (анализ на 5 хромосом)

3. Анеуплоидии по 13, 16, 18, 21, 22- й и  Х, Y хромосомам (анализ на 7 хромосом)

4. Анеуплоидии по 13, 14, 15, 16, 18, 21, 22- й и  Х, Y хромосомам (анализ на 9 хромосом)

В результате флуоресцентной гибридизации in situ с набором ДНК-зондов MultiVysion 4CC фирмы Abbott molecular в ядре клетки карциномы обнаружены три хромосомы X – сигналы синего цвета, три хромосомы 17 – зеленого цвета и полисомия по хромосоме 15 – красного цвета (собственные результаты).

В результате флуоресцентной гибридизации in situ с набором ДНК-зондов MultiVysion PGT фирмы Abbott molecular в ядрах нормальных мужских лимфоцитов выявляются по одной хромосоме X и Y –  сигналы синего и желтого цветов и по две хромосомы: 13 – сигналы красного, 18 – голубого и 21 – зеленого  цветов (собственные результаты).

Молекулярная генетическая диагностика (анализ ДНК матери): 

• Невынашивание беременности и патология плода;
• Риск развития внутриутробных инфекций;
• Наследственные моногенные заболевания.

Самопроизвольное прерывание беременности является одной из основных проблем современного акушерства. Этиология невынашивания беременности зависит от различных факторов. Это могут быть гормональные расстройства, в первую очередь вызванные гипофункцией яичников и гиперандрогенией, заболевания щитовидной железы. Причиной могут служить и различные инфекционные заболевания.

Особое место в понимании проблемы невынашивания беременности занимает генетическая предрасположенность к тромбозам и гипергомоцистеинемии, а также к подавлению внутриутробных инфекций на ранней стадии беременности.

Нарушение свертываемости крови приводит к повышенной склонности к образованию тромбов.  Данное заболевание может не иметь клинических симптомов до появления внешних факторов (беременность, травмы, операции). В случае беременности высокая склонность к тромбообразованию несет угрозу, в первую очередь, для плода. Образование сгустков крови приводит к нарушению кровообращения, следовательно, плод не получает достаточного количества питательных веществ. В результате часто происходит выкидыш на раннем сроке беременности.

Гипергомоцистеинемия - повышенное содержание гомоцистеина в клетках и межклеточном пространстве организма. Это может привести к дефектам развития центральной нервной системы у эмбриона, отслойке плаценты и задержке внутриутробного развития.

Внутриутробные инфекции являются важной причиной выкидышей на ранних сроках беременности. Интенсивность воспалительных процессов в организме связана со способностью вырабатывать цитокины.

Лаборатория «Литех» предлагает генетические профили:

• «Невынашивание беременности и патология плода» (полиморфизмы генов, влияющих на тонус кровеносных сосудов, развитие воспалительных процессов, свертывание крови,  а также полиморфизмы генов фолатного цикла).
• «Риск развития внутриутробных инфекций» (представлены полиморфизмы генов, которые влияют на уровень цитокинов в плазме крови).

Анализ данных профилей поможет врачу назначить поддерживающую терапию для сохранения здорового плода.

Также мы предлагаем диагностику носительства наиболее распространенных наследственных моногенных заболеваний, при наличии которых, супружеским парам, планирующим беременность,  мы рекомендуем проконсультироваться у врача-генетика. 

• муковисцидоз,
• фенилкетонурия,
• галактоземия,
• адреногенитальный синдром,
• нейросенсорная тугоухость.