Диагностика инфекций, передающихся половым путем (ИППП) методом ПЦР-анализа
Что такое ПЦР-анализ?
ПЦР (полимеразная цепная реакция) – самый быстрый и достоверный метод диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего его используют для выявления инфекций передающихся половым путем (ИППП) и вирусных гепатитов.
Полимеразная цепная реакция (Polymerase chain reaction) была открыта Кэри Б. Мюллисом в 1983 году, за что он и был удостоен Нобелевской премии. Часто ПЦР описывают как метод, с помощью которого ученые могут находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл."Иглой" является крошечный фрагмент ДНК или РНК микроорганизма, характерный только для данного вида возбудителя заболевания.
В качестве исследуемого материала для ПЦР анализа могут использоваться различные биологические выделения (слизь, моча, мокрота), соскобы эпителиальных клеток, кровь, сыворотка.
Метод ПЦР диагностики существенно дополняет спектр традиционных методов и анализов, используемых в микробиологической диагностике. ПЦР диагностика эффективна для обнаружения микроорганизмов трудно выявляемых в лабораторных условиях, атипичных форм бактерий, внутриклеточных паразитов и микроорганизмов, способных длительно существовать в организме хозяина и вызывать хронические заболевания.
Как это делают?
1. Из биоматериала пациента в лаборатории с помощью специальных реагентов выделяется искомый участок ДНК/РНК.
2. Затем проводится полимеразная цепная реакция, в результате которой количество специфических фрагментов возбудителя многократно увеличивается в результате чего становится возможной детекция.
3. После этого с помощью специальных маркёров определяется наличие (или отсутствие) фрагмента ДНК/РНК микроорганизма в биоматериале.
В лаборатории “Литех” используются надежные наборы реагентов для обнаружения ДНК возбудителей бактериальных и вирусных инфекций методом полимеразной цепной реакции, позволяющие контролировать не только ингибирование и адекватность постановки реакции, но и другие параметры:
• корректность забора клинической пробы;
• эффективность пробоподготовки;
• ошибки в проведении анализа (в т.ч. не внесение образца в амплификационную смесь);
• контаминацию на ранних стадиях (до стадии, обуславливающей необходимость повтора анализа).
Какие особенности влияют на результаты ПЦР анализа?
В зависимости от периода инфицирования и состояния иммунной системы у любого пациента может быть отрицательный результат даже при наличии инфекции.
В сомнительных случаях рекомендуется провести повторный анализ через 10-14 дней.
Как правильно подготовиться к сдаче ПЦР-анализа?
Выбор клинического материала для исследования определяется наиболее вероятным местом локализации возбудителя. При анализе ЗППП материал для исследования у мужчин – соскоб слизистой оболочки мочеиспускательного канала, который помещается в пробирку со специальным реагентом.
У женщин дополнительно берется на исследование содержимое влагалища, цервикального канала матки, уретры. Решение о выборе материала для исследования принимается врачом на основании совокупности жалоб пациента и клинических проявлений инфекции.
Взятие биологического материала, по возможности, должно проводиться в период обострения инфекции. Количество материала, забираемого для исследования, не должно быть избыточным, т.к. вместе с возбудителем в пробу попадают вещества, которые могут вызывать тормозить ПЦР или могут способствовать разрушению ДНК при хранении и транспортировке. При взятии мазков и соскобов достаточное количество материала - размером “со спичечную головку”. Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный одноразовый урогенитальный зонд (щеточка), который собирает необходимое количество эпителия, не травмируя слизистую, почти не впитывает образец и хорошо отдает собранный материал в жидкую транспортную среду.
Рекомендации:
• приходите на обследование в период обострения инфекции;
• после незащищённого полового контакта должно пройти не менее трех недель;
• закончите прием антибиотиков за 3 недели до исследования на ИППП;
• воздержитесь от половых отношений в течение 36 часов;
• во время менструации исследование не проводится.
В день обследования на наличие ИППП:
• Не проводите туалет половых органов, не применяйте дезинфицирующие средства и антибактериальное мыло.
• От последнего мочеиспускания до взятия материала должно пройти не менее 3 часов.
• Материал для исследования у женщин следует брать перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания. Женщинам нельзя спринцеваться; необходимо прекратить введение любых вагинальных свечей.
• По согласованию с лечащим врачом за 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.
Какие возбудители могут быть найдены при ПЦР анализе?
Bacteroides spp. (Бактероиды) - поражение женских внутренних половых органов: цервициты, эндометриты, аднекситы, ВЗОМТ инфекции в малом тазу. Обнаруживают бактероиды и при простатитах, хронических осложнённых уретритах.
Chlamydia trachomatis (Хламидия) - именно она чаще всего причина негонококкового уретрита у мужчин (23–55%)
Cytomegalovirus (Цитомегаловирус) - Цитомегаловирусная инфекция опасна при заражении матери во время беременности.
Epstein Barr virus (Вирус Эпштейна-Барр) - инфекционный мононуклеоз или болезнь поцелуев, кроме того является одной из причин лимфогранулематоза, причиной лимфомы Беркитта. У многих людей, заражённых вирусом Эпштейна — Барр, болезнь проходит бессимптомно. В настоящее время данному вирусу наряду с другими герпесвирусами приписывается важная роль в формировании опухолевых клеток в организме человека.
Gardnerella vaginalis (Гарднерелла) - одна из причин бактериального вагиноза.
HPV (вирус папилломы человека) папилломавирусная инфекция, остроконечные кондиломы
HSV 1,2 герпес вирусная инфекция, генитальный герпес
Mobiluncus curtisii (мобилункус) - одна из причин бактериального вагиноза
Mycoplasma genitalium (Микоплазма) - негонококковые уретриты (12–25%), простатиты.
Mycoplasma hominis Микоплазма - негонококковые уретриты, простатиты, воспалительные заболевания матки и придатков, пиелонефрит.
Neisseria gonorrhoeae (Гонококк) - гонорея относится к "классическим" заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). При этом заболевании возможно поражение мочеиспускательного канала (уретры), прямой кишки, глотки, шейки матки и глаз.
Toxoplasma gondii (Токсоплазма) - Токсоплазмоз является одной из так называемых TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских названий инфекций: токсоплазма, краснуха, цитомегаловирус, герпес), являющихся опасными для плода.
Trichomonas vaginalis (Трихомонада) - Трихомониаз является одним из наиболее распространенных венерических заболеваний. У женщин поражается влагалище, у мужчин – мочеиспускательный канал и предстательная железа.
Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Ureaplasma spp. негонококковый уретрит вызывается Ureaplasma urealyticum (20–40%) уреаплазмы являются условно-патогенными микроорганизмами. Они способны вызвать ряд заболеваний, но в тоже время нередко их выявляют и у здоровых людей.
