Диагностика туберкулеза методом T-SPOT.ТB

Метод определения: Прямая оценка функции Т-клеток ELISPOT
Исследуемый биоматериал: Плазма крови с лития гепарином

T-SPOT.TB – современный метод диагностики туберкулёзной инфекции по анализу крови, применяемый как альтернатива кожным пробам. Исследование выполняется in vitro и основано на количественном определении мононуклеарных клеток периферической крови, продуцирующих гамма-интерферон в ответ на присутствие белков CFP-10 и ESAT-6 микобактерии туберкулёза.

Название теста складывается из двух частей. Буква Т обозначает Т-лимфоциты – клетки крови, которые вырабатывают интерферон и отвечают за клеточный иммунитет. Слово SPOT переводится с английского как «пятно»: каждое выявленное пятно показывает один активный Т-лимфоцит и выработку им интерферона. Если микобактерия туберкулёза ранее попадала в организм, Т-лимфоциты уже познакомились с её белками и в лабораторном опыте реагируют на встречу с ними, что и даёт положительный результат.
Туберкулёз – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулёзного комплекса. Наиболее распространён воздушно-капельный путь передачи, при котором возбудитель выделяется в окружающую среду с каплями мокроты при кашле, чихании и громком разговоре. Заболевание распространено широко: почти каждый человек встречается с туберкулёзной микобактерией в течение жизни, но в большинстве случаев болезнь не развивается. Примерно в 10% случаев контакта с бактерией развивается туберкулёз в виде активной или латентной инфекции. Активная форма проявляется длительной лихорадкой, кашлем, ночными потами, снижением массы тела и наличием инфекционных очагов в лёгких, реже в костях и органах мочеполовой системы. Латентная инфекция не имеет специфических признаков болезни и не распознаётся инструментальными методами, что затрудняет её выявление.

После проникновения возбудителя в организм возможны три варианта развития событий: полная элиминация микобактерий, развитие первичного туберкулёза при быстром росте и размножении бактерий и латентная инфекция, при которой микобактерии персистируют в неактивном состоянии, обусловливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания. Носители не распространяют инфекцию, но у части пациентов латентная инфекция переходит в клинически манифестированное заболевание, и риск такой прогрессии увеличивается при ослаблении иммунной системы. Пожизненный риск заболевания среди инфицированных составляет 10%, при ВИЧ-инфицировании – 50%.

Иммунодиагностику туберкулёзной инфекции ведут двумя способами. Кожные тесты, к которым относятся проба Манту и проба с аллергеном туберкулёзным рекомбинантным, основаны на внутрикожном введении антигенов микобактерий, вызывающих аллергическую реакцию в месте введения: на коже образуется уплотнение, папула, которую через 72 часа измеряют для оценки результата. Тесты in vitro, к которым относится T-SPOT.TB, проводятся по анализу крови и исключают взаимодействие организма с антигенами возбудителя. Оба подхода оценивают иммунную реакцию человека на антигены возбудителя и не являются методами прямого выявления инфекционного агента.
Особое значение исследование имеет в детском возрасте. Более чем в половине случаев туберкулёз у детей протекает бессимптомно, поэтому основным методом его выявления служит ежегодная иммунодиагностика, а в группах высокого риска обследование проводится дважды в год; его проходят при поступлении в школу или детский сад и перед поездкой в детский лагерь. Кожные пробы имеют противопоказания и показаны не всем детям, кроме того, при их применении возможны нежелательные реакции – недомогание, головная боль, повышение температуры, а проба Манту часто даёт ложноположительные результаты у детей, вакцинированных БЦЖ. При наличии противопоказаний, при сомнительных результатах кожных проб или при отказе родителей от их проведения рекомендованы альтернативные тесты in vitro. Такие тесты входят в российские клинические рекомендации как альтернативный метод выявления туберкулёзной инфекции у детей, а согласно приказу Министерства здравоохранения Российской Федерации от 11 апреля 2025 года № 190н, вступившему в силу 1 сентября 2025 года, при профилактических осмотрах детей от 8 до 17 лет включительно могут учитываться результаты IGRA-тестов, полученные в сроки проведения осмотров.

В основе исследования лежит технология ELISPOT, позволяющая выявлять в образце крови присутствие реактивных, специфически сенсибилизированных Т-эффекторных клеток CD4 и CD8, продуцирующих интерферон в ответ на воздействие антигенов ESAT-6 и CFP-10. Эти белки отсутствуют в вакцинном штамме БЦЖ, поэтому перекрёстная реакция с компонентами вакцины исключена. Чувствительность метода составляет около 95%, специфичность – около 97%. Исследование не имеет противопоказаний и ограничений по времени проведения, не требует повторного визита для оценки результата и не накладывает ограничений после проведения: разрешено мыться и посещать бассейн. Точность результата не зависит от возраста ребёнка и сохраняется у детей младше пяти лет. Применение теста снижает необходимость в дополнительном обследовании лучевыми методами – флюорографией и компьютерной томографией органов грудной клетки. Тест менее подвержен влиянию иммуносупрессии, чем другие исследования на туберкулёз, поэтому предпочтителен при обследовании ВИЧ-инфицированных и пациентов, получающих иммуносупрессанты, и позволяет диагностировать внелёгочные формы туберкулёза.
Исследование показывает наличие инфицирования возбудителем туберкулёза на момент его проведения. При этом тест не позволяет различить активный и латентный туберкулёз, а также лёгочные и внелёгочные формы заболевания. Он является непрямым методом исследования инфекции и рекомендуется в качестве дополнения к стандартным диагностическим исследованиям.