Комплексное исследование возбудителей ОРЗ (ПЦР комплекс на 13 возбудителей)

Метод определения: Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Исследуемый биоматериал: Соскоб из носоглотки, Соскоб из ротоглотки

Этиологическая диагностика острых респираторных вирусных инфекций: в исследуемом материале выявляется генетический материал вирусов, которые чаще прочих поражают верхние и нижние дыхательные пути, что служит дифференциальной диагностике вирусных инфекций дыхательных путей. Определяемые показатели:
1. Human rhinovirus
2. Human metapneumovirus
3. Human bocavirus
4. Human parainfluenza virus type 1
5. Human parainfluenza virus type 2
6. Human parainfluenza virus type 3
7. Human parainfluenza virus type 4
8. Human coronavirus NL63
9. Human coronavirus 229E
10. Human coronavirus HKU1
11. Human coronavirus OC43
12. Human respiratory syncytial virus
13. Human adenovirus

В этиологии острых респираторных заболеваний ведущее место принадлежит вирусам. ОРВИ – обширная группа инфекционно-воспалительных заболеваний с поражением носоглотки, гортани, трахеи и бронхов, и основная их доля приходится на возбудителей с тропностью к определённым отделам дыхательных путей: аденовирусы, риновирусы, коронавирусы, вирусы парагриппа, респираторно-синцитиальный вирус, а также метапневмовирусы и бокавирусы, открытые сравнительно недавно. По таксономической принадлежности это парамиксовирусы, куда входят респираторно-синцитиальный вирус, метапневмовирус человека и вирусы парагриппа 1-4; далее коронавирусы; пикорнавирусы, к которым относятся риновирусы; а из ДНК-содержащих – аденовирусы видов B, C, E и парвовирусы, представленные бокавирусом человека. Практически все они вызывают заболевания, при которых воспаляется слизистая оболочка дыхательных путей и выражена интоксикация. Обязательный патогенетический этап – внедрение вируса в эпителиальные клетки дыхательных путей и размножение в них: эпителиоциты гибнут, вирусы выходят в межклеточное пространство и заражают новые клетки.

Респираторно-синцитиальный вирус во всём мире служит основной причиной бронхиолита и пневмонии у детей младшего возраста и младенцев; у пожилых и пациентов с иммунодефицитом заболевание протекает тяжело. Вирус устойчив во внешней среде и около часа сохраняет жизнеспособность на окружающих больного поверхностях, отчего высока вероятность заражения контактирующих лиц. Метапневмовирус, РНК-содержащий вирус семейства парамиксовирусов, стоит на втором месте после РС-вируса среди причин острого бронхиолита на первом году жизни. У детей, пожилых и лиц с иммунодефицитом он поражает нижние дыхательные пути с развитием бронхита, бронхиолита, пневмонии, а также даёт гриппоподобный синдром; часты смешанные инфекции, например с РС-вирусом. Вирусами парагриппа к двум годам хотя бы однократно переболевает каждый ребёнок. Типы 1 и 2 клинически проявляются ларингитом и воспалением верхних отделов трахеи, нередко осложняясь крупом; тип 3 чаще поражает нижние дыхательные пути с развитием бронхиолита и пневмонии, особенно у детей и взрослых с ослабленным иммунитетом; тип 4 выявляется редко и протекает мягко, с поражением верхних дыхательных путей.

Коронавирусная инфекция протекает преимущественно с поражением верхних дыхательных путей, гораздо реже – с бронхиолитом и пневмонией; кишечная разновидность встречается редко и в основном у детей. Появление новых типов коронавирусов связывают с высокой способностью этих вирусов к мутациям. Риновирусы воспаляют слизистую оболочку верхних дыхательных путей; инфекция проявляется насморком, кашлем и нередко осложняется трахеитом, у маленьких детей способна давать бронхиолит, а обострение бронхиальной астмы у детей часто ассоциировано именно с ней. Аденовирусы видов B, C и E преимущественно поражают дыхательные пути с картиной ринофарингита и трахеита: лихорадка, кашель, выделения из носа, першение в горле. Известно бессимптомное носительство, когда вирус месяцами и годами сохраняется в лимфоидной ткани верхних отделов дыхательных путей. У лиц с иммунодефицитом и реципиентов органов на иммуносупрессивной терапии аденовирусы дают генерализованные инфекции с вовлечением желудочно-кишечного тракта, лёгких и нервной системы. Бокавирус вызывает гастроэнтериты и инфекции верхних, а также нижних отделов респираторного тракта, преимущественно у детей, причём типична коинфекция с другими возбудителями; у взрослых он даёт лёгкие симптомы острого респираторного заболевания при тесном контакте с болеющими детьми, а при иммунодефиците изредка обнаруживается при пневмонии.

Клиническая картина ОРВИ сходна, что затрудняет разграничение заболеваний, и точное определение вида инфекции без лабораторных методов невозможно. При этом аденовирусы, респираторно-синцитиальный вирус и вирусы парагриппа способны давать тяжёлое течение с осложнениями, а у пациентов группы риска – детей, пожилых, лиц с иммунодефицитами – приводить к летальному исходу. Традиционные методы – иммунологические, серологические, микробиологические – уступают по чувствительности, не универсальны, плохо воспроизводимы и требуют долгого ожидания ответа. Полимеразная цепная реакция превосходит их по диагностической чувствительности и специфичности, в том числе иммунохроматографию и иммунофлуоресценцию. Исследуемое отделяемое дыхательных путей содержит погибшие эпителиальные клетки и вирусные частицы. Принцип метода состоит в обнаружении специфичных фрагментов РНК или ДНК вируса и их избирательном синтезе, то есть амплификации с образованием огромного числа копий, что позволяет легко их детектировать. Преимущества метода: прямое указание на присутствие вируса по специфическому участку его РНК или ДНК; высокая специфичность, поскольку идентифицируется фрагмент, уникальный и характерный лишь для данного вируса; высокая чувствительность, позволяющая обнаружить возбудитель при чрезвычайно малой исходной концентрации.