Анализ бактериальный вагиноз : микроскопия; пцр

Микробиоценоз влагалища - это сложившаяся экологическая система, основная функция которой защитная. Микрофлора влагалища способна реагировать качественными и количественными изменениями на любые физиологические и патологические сдвиги в состоянии макрорганизма и препятствовать инвазии патогенных микрорганизмов.
Ведущее место в вагинальном микробиоценозе занимают лактобактерии (80-90%), число которых может достигать 109КОЕ/мл. Колонизируя слизистую влагалища, лактобактерии участвуют в формировании экологического барьера и обеспечивают тем самым резистентность вагинального биотопа.
Нарушение нормальной микрофлоры влагалища приводит к возникновению переходного состояния бактериального вагиноза, наиболее широко распространенного заболевания у женщин детородного возраста. Бактериальный вагиноз (БВ) - это переходное состояние вагинального биоценоза, характеризующееся замещением лактофлоры G. vaginalis и условно-патогенной анаэробной флорой, в первую очередь представителями семейства Bacteroides, Mobiluncus, M. hominis и U.urealyticum.

Предварительный диагноз БВ может быть поставлен при наличии у пациентки 3-х из 4-х перечисленных признаков:
•1 наличие “ключевых” клеток при цитологическом исследовании урогенитального мазка;
•2 рН влагалищного отделяемого >4,5;
•3 специфический характер выделений;
•4 положительный аминотест
Окончательное установление диагноза БВ возможно только на основании данных о состоянии микрофлоры влагалища. Комплексная диагностика состояния вагинальной микрофлоры, основанная на сочетании микроскопического исследования мазка и ПЦР анализа позволяет выявить изменения вагинальной микрофлоры, характерные для БВ:
•1 резкое снижение количества или отсутстви лактобактерий;
•2 увеличение количества G.vaginalis, грамотрицательных анаэробных бактерий – Mobiluncus сurtissi., Bacteroides spр., а также M.hominis и U.urealyticum;
•3 наличие “ключевых” клеток при цитологическом исследовании мазка;
•4 наличие или отсутствие лейкоцитарной реакции.

Для оценки состояния микробиоценоза влагалища параллельно с определением ДНК микроорганизмов методом ПЦР проводится микроскопическое исследование вагинального мазка для оценки состояния эпителия, наличия “ключевых” клеток, количества лейкоцитов, наличия прочей флоры и др.
Для диагностики БВ производят взятие материала из заднего и бокового сводов влагалища. Hе рекомендуется взятие мазков из цервикального канала или уретры, поскольку их микрофлора не идентична и не может характеризовать БВ, хотя и несет определенную информацию о наличии воспалительного процесса.
Результат ПЦР-исследования
Результат микроскопического исследования
Заключение
Рекомендация

Lactobacillus spp…… (+) положит
Gardnerella vaginalis….(-) или (+)
Mycoplasma hominis…….(-) или (+)
Ureaplasma urealyticum…(-) или (+)
Mobiluncus curtisii……….(-) или (+)
Bacteroides spp……….(-) отрицат.
наличие единичных лейкоцитов и единичных «чистых» эпителиальных клеток соответственно фазе МЦ;
Доминирование лактобактерий, отсутствие грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия, псевдогифов
НОРМОЦЕНОЗ
норма

Lactobacillus spp……(-) отрицат
Gardnerella vaginalis..(-) отрицат
Mycoplasma hominis….(-) отрицат
Ureaplasma urealyticum(-) отрицат
Mobiluncus curtisii………(-) отрицат
Bacteroides spp……….(-) отрицат
Лейкоциты – в небольшом количестве;
Полное отсутствие в исследуемом материале микрофлоры при неизменных эпителиоцитах
КОМПЕНСИРОВАННЫЙ
БАКТЕРИАЛЬНЫЙ
ВАГИНОЗ
Наблюдение,
Повторное исследование через 1-2 месяца

Lactobacillus spp………(-) отрицат
Gardnerella vaginalis(-), оч редко(+)
Mycoplasma hominis……….чаще(+)
Ureaplasma urealyticum… чаще(+)
Mobiluncus curtisii………(+) или (-)
Bacteroides spp……….(+) или (-)
«ключевые» клетки единичные в поле зрения;
умеренный лейкоцитоз (15-25 лейкоцитов в поле зрения);
возрастание количества сопутствующей грамвариабельной полиморфной бактериальной флоры
СУБКОМПЕНСИРОВАННЫЙ
БАКТЕРИАЛЬНЫЙ
ВАГИНОЗ
Заместительная терапия (местное лечение лактобактерином)

Lactobacillus spp………(-) отрицат
Gardnerella vaginalis…(+) положит
Mycoplasma hominis…(+) положит
Ureaplasma urealyticum(+) положит
Mobiluncus curtisii……(+) положит
Bacteroides spp…… (+) положит
«ключевые» клетки в большом количестве;
лейкоциты в умеренном количестве;
присутствие бактериальной флоры в виде монокультуры или в различных морфо- и видовыхсочетаниях
ДЕКОМПЕНСИРОВАННЫЙ
БАКТЕРИАЛЬНЫЙ
ВАГИНОЗ
Этиотропное лечение (антибактериальная терапия, направленная в основном против анаэробной флоры)

Lactobacillus spp………(-) отрицат
Gardnerella vaginalis…(-) отрицат
Mycoplasma hominis……(-) отрицат
Ureaplasma urealyticum(-) отрицат
Mobiluncus curtisii……..(-) отрицат
Bacteroides spp………….(-) отриц
Большое количество лейкоцитов, макрофагов, эпителиальных клеток, выраженный фагоцитоз, морфологический пейзаж воспалительного процесса на фоне полного отсутствия лактобактерий и отсутствии явно выраженного этиотропного возбудителя
НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЙ
ВАГИНИТ
Проведение дополнительного микробиологического исследования на наличие возбудителя (посев с выделением чистой культуры с определением чувствительности к антибиотикам)

При обнаружении специфического этиотропного агента: гонококков, трихомонад, мицелия, псевдогифор, сопр – выставляется соответствующий этиологический диагноз (гонорея, трихомониаз, микотический вагинит и др.)
СПЕЦИФИЧЕСКИЙ
ВАГИНИТ
Этиотропное лечение


Анализы в лаборатории «ЛИТЕХ»:
Метод исследования: полимеразная цепная реакция (ПЦР) + микроскопическое исследование мазка.
Материал для исследования: мазок из заднего или бокового свода влагалища;
Для ПЦР-исследования: мазок поместить в пробирку с реагентом «ДНК-ЭКСПРЕСС». Пробирку можно хранить при -20оС в течение 10 дней.
Микроскопическое исследование – мазок помещается на отдельное одноразовое предметное стекло и высушивается на воздухе. Хранить стекло при комнатной температуре.